全国100所名校最新高考冲刺卷样卷一2023生物-2024-2025英语周报圈

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据图分析，与单种相比，混种的薇甘菊植株叶绿素含量▲，叶面积▲，导致其光合速率发生了相应的变化。由此推测，香茅▲（能或不能）抑制薇甘菊的生长，其原因是▲(2分)。24.(12分)多酚氧化酶(PP0)基因的大量表达是促使果实褐变的主要原因之一。科研人员将外源多酚氧化酶基因的同源片段(ASPPO)与载体结合，构建PPO基因的反义表达载体(重组质粒2)，并在农杆菌介导下实现了对鸭梨组培苗的转化，其操作流程如下图1，图中限制酶SacI的识别序列为GAGCTC,限制酶XbaI的识别序列为T'CTAGA,限制酶Hind III的识别序列为A'AGCTT,Kan为卡那霉素抗性基因，aadA为链霉素抗性基因。请回答下列问题。Kan'RT-PCR终止子们①ASPPO导入大肠杆菌④重组质粒2重组质拉1ASPPO质拉1标记基因启动子标记基因Kan'终止子aadASac-农杆菌质粒2Xba1⑤启动子了前伤组织Hind ]II鸭梨植株图1(1)多酚氧化酶基因的同源片段(ASPPO)的获取：根据PP0基因3'端450bp的片段两侧的碱基序列设计引物进行过程①。过程①中需要使用的酶有▲，为使扩增出的ASPPO基因能与质粒2构建反义表达载体，左、右侧引物▲(5或3')端分别需添加的序列是▲（2分)。(2)ASPPO片段的克隆：将ASPPO片段与质粒1连接形成的重组质粒1导入大肠杆菌，该过程需预先用Ca2+处理大肠杆菌，其目的是▲。与体外扩增相比，将重组质粒1导入大肠杆菌中扩增的优点有▲。(3)PPO基因反义表达载体的构建：过程④中利用▲酶将ASPPO片段与质粒2定向连接形成重组质粒2，导入农杆菌后进行筛选、测序鉴定，再使用▲（物理状态）培养基扩大培养农杆菌。(4)鸭梨的遗传转化：将预培养的鸭梨叶片愈伤组织置于上述农杆菌菌液中浸渍5min后，再将愈伤组织转接到添加▲（抗生素）的选择培养基中培养。(⑤)反义转基因鸭梨的检测：科研人员分别提取了非转基因鸭梨植株叶片及转基因鸭梨植株叶片的总RNA,以PPO基因编码区全长为探针进行杂交检A测转基因鸭梨的内源PP0基因转录情况，结果如图2。该检测的原理是▲，实验结果表明植株▲(A或B)可能是成功实现转化的转基因植株。为进一步验证获得的转基图2因植株是否是耐褐化新品种，还需进行的检测是▲。决胜新高考一一2023届高三年级大联考（生物）第8页（共8页）

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